ОПРЕДЕЛЕНИЕ ЧУВСТВИТЕЛЬНОСТИ К КОЛИСТИНУ КАРБАПЕНЕМОРЕЗИСТЕНТНЫХ ШТАММОВ KLEBSIELLA PNEUMONIAE МОДИФИЦИРОВАННЫМ МЕТОДОМ ЭЛЮЦИИ ДИСКА КОЛИСТИНА В БУЛЬОН (CBDE)

Цель:

Апробировать определение чувствительности к колистину карбапенеморезистентных штаммов K. pneumoniae модифицированным методом элюции диска колистина в бульон (Colistin Broth Disk Elution – CBDE) и сравнить с результатами, полученными с помощью коммерческих тест-систем.

Материалы и методы:

Исследовали 89 последовательно выделенных из клинического материала от пациентов ОРИТ карбапенеморезистентных штаммов K. pneumoniae. Определяли МПК (54 штамма) с помощью тест-систем MIC G1 и MIC G2 или ТПК (МПК в варианте пограничных концентраций) (35 штаммов) с помощью тест-систем SENSI-LA-TEST G1 и SENSI-LA-TEST G2 (Erba Mannheim, Германия). Параллельно проводилось определение МПК колистина модифицированным методом CBDE. Для приготовления рабочих растворов использовали четыре пробирки с разлитым по 10 мл бульоном Мюллера-Хинтон (Becton Dickinson, США), в которые вносили 0, 1, 2, 4 диска колистина с нагрузкой 10 мкг (Becton Dickinson, США), создавая концентрации 0 (контроль роста), 1, 2 ,4 мкг/мл. Пробирки инкубировали при 37С в течение 2 ч. Затем растворы тщательно перемешивали и разливали в пробирки по 1 мл. Готовили микробную суспензию исследуемого штамма плотностью 0,5 по МакФарланду, вносили в пробирки по 5 мкл. В качестве контрольного штамма использовали E. coli ATCC 25922. Инкубировали при 37°С в течение 18-24 ч. Отмечали как МПК первую пробирку с видимым отсутствием роста. Результаты оценивали в соответствии с критериями Клинических Рекомендаций «Определение чувствительности микроорганизмов к антимикробным препаратам» версия 2018-3.

Результаты:

Из 89 штаммов резистентность к колистину (МПК >2 мг/л) в исследовании с помощью коммерческих тест-систем продемонстрировали 23 штамма (25,8%), модифицированным методом CBDE – 18 штаммов (20,2%). Несовпадения обнаружены в 11 случаях (12,4%), причем в 8 из них штаммы, определенные как резистентные с помощью тест-систем, проявили чувствительность в модифицированном методе CBDE, в 3 случаях – наоборот.

Выводы:

Результаты определения чувствительности к колистину модифицированным методом элюции диска колистина в бульон сопоставимы с результатами, полученными с помощью коммерческих тест-систем. Необходимы дальнейшие исследования с целью валидации данного метода как доступного для практических лабораторий метода определения чувствительности к колистину полирезистентных штаммов грамотрицательных бактерий.