РАСПРОСТРАНЕННОСТЬ ПНЕВМОКОККОВ СО СНИЖЕННОЙ ЧУВСТВИТЕЛЬНОСТЬЮ К ПЕНИЦИЛЛИНУ СРЕДИ ДЕТЕЙ КРАСНОЯРСКОГО КРАЯ
Протасова И.Н., Бахарева Н.В., Ильенкова Н.А., Мартынова Г.П., Демко И.В., Елистратова Т.А., Сульдина А.Г., Сидоренко С.В.
ФГБОУ ВО «Красноярский государственный медицинский университет им. проф. В.Ф. Войно-Ясенецкого» Минздрава России, Красноярск, Россия
Министерство здравоохранения Красноярского края, Красноярск, Россия
ФГБУ «Детский научно-клинический центр инфекционных болезней» ФМБА России, Санкт-Петербург, Россия
Цель:
Оценить распространенность пневмококков со сниженной чувствительностью к пенициллину среди детей Красноярского края.
Материалы и методы:
Исследована чувствительность к пенициллину 462 штаммов S. pneumoniae, полученных от детей в возрасте от 0 до 17 лет 11 мес. 29 дней. 60 изолятов были выделены от больных с гнойным средним отитом, внебольничной пневмонией, гнойным бактериальным менингитом, острым тонзиллитом. 402 штамма были получены от здоровых детей. Скрининг с 1 мкг оксациллина проводился на среде Мюллера- Хинтон с добавлением 5% дефибринированной лошадиной крови и 20 мг/л бета-НАД. У штаммов c диаметром зоны задержки роста >20 мм определялась МПК бензилпенициллина с помощью Е-теста (bioMerieux, Франция). Результаты интерпретировали в соответствии с рекомендациями «Определение чувствительности микроорганизмов к антимикробным препаратам» (МАКМАХ, 2018). Для контроля использовался S. pneumoniae ATCC 49619. Выявление наличия мутаций в генах pbp1a, pbp2x и pbp2b, кодирующих пенициллиносвязывающие белки (ПСБ), проводилось с помощью мультиплексной ПЦР по методике Nagai K., Ubukata K., 2001.
Результаты:
По результатам скрининга устойчивость к оксациллину выявлена у 199 штаммов из 462 (43,1%). Нечувствительными к пенициллину (МПК >0,064 мг/л) были 183 штамма (39,6%). Из них у 27 штаммов МПК бензилпенициллина составляла 0,094 мг/л, у 56 – находилась в пределах 0,125-0,75 мг/л, у 67 – 1-1,5 мг/л, у 28 – 2 мг/л, и лишь у 5 изолятов превышала 2 мг/л. У 119 штаммов (65%) выявлены мутации во всех 3 генах ПСБ (pbp1a, pbp2x и pbp2b), при этом МПК50 составила 1,5 мг/л. У 42 (23%), 12 (6,6%) и 8 (4,4%) изолятов были выявлены мутации в генах pbp1a, pbp2x; pbp1a, pbp2b и pbp2x, pbp2b соответственно; МПК при этом составила 0,094, 0,25 и 0,094 мг/л. Лишь у 2 штаммов были выявлены мутации в одном гене ПСБ. При тестировании чувствительных к пенициллину изолятов (n = 263) с МПК ≤0,064 мг/л было выявлено 27 штаммов, имеющих мутации в генах ПСБ. У большинства из них (22 изолята) присутствовали мутации в 2 генах: pbp2x и pbp2b (n = 15); pbp1a и pbp2x (n = 7). Половина данных культур (n = 14) демонстрировала положительный скрининговый тест с 1 мкг оксациллина.
Выводы:
Распространенность пневмококков, нечувствительных к пенициллину, среди детей Красноярского края высока и составляет 39,6%. МПК большинства штаммов (97,3%) не превышает 2 мг/л, т.е. данные изоляты относятся к умеренно устойчивым (за исключением менингитных). Снижение чувствительности к пенициллину обусловлено изменением структуры ПСБ, что подтверждается наличием мутаций в генах pbp1a, pbp2x и pbp2b в различных сочетаниях.