ЗНАЧЕНИЕ ПРИРОДНЫХ ВАРИАНТОВ ИНТЕРНАЛИНА В В ВИРУЛЕНТНОСТИ ЛИСТЕРИЙ

Лаврикова А.Я., Чаленко Я.М., Сысолятина Е.В., Собянин К.А., Калинин Е.В., Ермолаева С.А.

ФГБУ «НИЦЭМ им. Н.Ф. Гамалеи» Минздрава России, Москва, Россия

ННИВИ – филиал ФГБНУ ФИЦВиМ, Москва, Россия

Московский физико-технический институт, Долгопрудный, Россия

Цель:

Установление механизмов, определяющих различия во вкладе природных вариантов интерналина В (InlB) в вирулентность листерий.

Материалы и методы:

Три доминантных аллельных варианта InlB были клонированы из изолятов L. monocytogenes в штамм E. coli BL21 для экспрессии белков. Полученные рекомбинантные белки были очищены и протестированы in vitro с помощью ELISA, а также с помощью флуоресцентной микроскопии и Western-blotting анализа на культуре клеток HEp-2, HUVEC и перитонеальных макрофагах мыши.

Результаты:

Исследование активации внутриклеточных сигнальных путей показало, что природные варианты отличаются динамикой в активации эффекторных молекул двух основных внутриклеточных сигнальных путей, активирующихся в результате взаимодействия c-Met с лигандом: MAPK и P3K/Akt. Также было установлено, что IdInlB14 и в гораздо меньшей степени IdInlB9, образовали крупные комплексы с фосфо-c-Met и gC1qR на периферии клетки, в противоположность этому IdInlB13 подобные комплексы не формировал. Природные варианты InlB в разной степени влияли на экспрессию интерферонов I типа. Из трех исследованных аллельных вариантов, только в присутствии IdInlB14 наблюдалась продукция интерферонов культурах первичных клеток HUVEC и перитонеальных макрофагах мыши.

Выводы:

Природные варианты интерналина В отличаются своими физико-химическими и биологическими свойствами.

Работа выполнена при поддержке Российского научного фонда (грант № 18-75-00024).